|
ระบบยูคาริโอตยีสต์ | |
ระบบยูคาริโอตยีสต์ระบบการแสดงออกโดยใช้S. cerevisiaeหรือPichia pastorisช่วยให้สามารถผลิตโปรตีนได้อย่างเสถียรและยั่งยืนซึ่งผ่านกระบวนการคล้ายกับเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมโดยให้ผลผลิตสูงในอาหารที่กำหนดทางเคมีของโปรตีนเชื้อราใยเชื้อราโดยเฉพาะอย่างยิ่งAspergillusและเชื้อรา Trichodermaแต่ยังเมื่อเร็ว ๆได้รับการพัฒนาเป็นแพลตฟอร์มการแสดงออกสำหรับการคัดกรองและการผลิตที่มีความหลากหลายเอนไซม์อุตสาหกรรม ระบบการแสดงออก C1 แสดงสัณฐานวิทยาที่มีความหนืดต่ำในวัฒนธรรมที่จมอยู่ใต้น้ำทำให้สามารถใช้สื่อการเจริญเติบโตและการผลิตที่ซับซ้อนได้ ไวรัส -infected เซลล์บาคูโลไวรัส - เซลล์แมลงที่ติดเชื้อ( Sf9 , Sf21 , สายพันธุ์High Five ) หรือเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ( HeLa , HEK 293 ) อนุญาตให้ผลิตโปรตีนไกลโคซิลหรือเมมเบรนที่ไม่สามารถผลิตได้โดยใช้ระบบเชื้อราหรือแบคทีเรีย มีประโยชน์สำหรับการผลิตโปรตีนในปริมาณสูง ยีนจะไม่แสดงออกอย่างต่อเนื่องเนื่องจากในที่สุดเซลล์โฮสต์ที่ติดเชื้อก็จะเหี่ยวและตายในแต่ละรอบการติดเชื้อ การแสดงออกของเซลล์แมลงที่ไม่เป็น lytic การแสดงออกของเซลล์แมลงที่ไม่ไลติคเป็นอีกทางเลือกหนึ่งของระบบการแสดงออกของไลติกบาคูโลไวรัส ในการแสดงออกที่ไม่ใช่ lytic เวกเตอร์จะ transiently หรือเสถียรtransfectedเข้าไปในโครโมโซมของเซลล์แมลงสำหรับการแสดงออกของยีนที่ตามมาตามด้วยการคัดเลือกและคัดกรองรีคอมบิแนนท์โคลนนิ่ง [24]ระบบ non-lytic ถูกนำมาใช้เพื่อให้ผลผลิตโปรตีนที่สูงขึ้นและการแสดงออกของยีนรีคอมบิแนนต์เร็วขึ้นเมื่อเทียบกับการแสดงออกของเซลล์ที่ติดเชื้อบาคูโลไวรัส สายเซลล์ที่ใช้สำหรับระบบนี้ ได้แก่Sf9 , Sf21จากเซลล์Spodoptera frugiperda , Hi-5จากTrichoplusia niเซลล์และSchneider 2 เซลล์และ Schneider 3 เซลล์จากDrosophila melanogaster cells ด้วยระบบนี้เซลล์จะไม่เล็ดลอดออกไปและสามารถใช้โหมดการเพาะปลูกหลายโหมดได้ นอกจากนี้การผลิตโปรตีนสามารถทำซ้ำได้ระบบนี้ให้ผลิตภัณฑ์ที่เป็นเนื้อเดียวกันข้อเสียเปรียบของระบบนี้คือความต้องการของขั้นตอนการตรวจคัดกรองเพิ่มเติมสำหรับการเลือกที่ทำงานได้โคลน ระบบการแสดงออกของ Leishmania tarentolae (ไม่สามารถติดเชื้อในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม) ช่วยให้สามารถผลิตโปรตีนได้อย่างคงที่และยั่งยืนโดยให้ผลผลิตสูงในอาหารที่กำหนดทางเคมี โปรตีนที่ผลิตได้แสดงการดัดแปลงหลังการแปลแบบยูคาริโอตอย่างเต็มที่รวมถึงการสร้างไกลโคซิเลชันและการสร้างพันธะไดซัลไฟด์ | |
ผู้ตั้งกระทู้ หมวย (bamkannika003132-at-gmail-dot-com) :: วันที่ลงประกาศ 2020-10-27 12:56:38 |
Copyright © 2013 All Rights Reserved. |
Visitors : 225162 |