ReadyPlanet.com


การผลิตโปรตีนเป็นเทคโนโลยี


การผลิตโปรตีนเป็นเทคโนโลยีชีวภาพกระบวนการของการสร้างเฉพาะโปรตีน มันมักจะทำได้โดยการจัดการของการแสดงออกของยีนในสิ่งมีชีวิตดังกล่าวว่าเป็นการแสดงออกถึงจำนวนมากของยีน recombinant ซึ่งรวมถึงการถอดความของดีเอ็นเอรีคอมบิแนนท์ไปเป็นสารอาร์เอ็นเอ ( mRNA ) การแปล mRNA เป็นโซ่โพลีเปปไทด์ซึ่งในที่สุดจะพับเป็นโปรตีนที่ใช้งานได้และอาจกำหนดเป้าหมายไปยังตำแหน่งที่อยู่ใต้เซลล์หรือนอกเซลล์ที่เฉพาะเจาะจง

ระบบการผลิตโปรตีน (ศัพท์แสงในห้องปฏิบัติการยังเรียกว่า "ระบบการแสดงออก" จะถูกนำมาใช้ในชีวิตวิทยาศาสตร์ , เทคโนโลยีชีวภาพและการแพทย์ การวิจัยอณูชีววิทยาใช้โปรตีนและเอนไซม์จำนวนมากซึ่งส่วนใหญ่มาจากระบบการแสดงออก โดยเฉพาะอย่างยิ่งDNA polymeraseสำหรับPCR , reverse transcriptaseสำหรับการวิเคราะห์ RNA, endonucleases ที่ จำกัดสำหรับการโคลนและสร้างโปรตีนที่คัดกรองในการค้นพบยาเป็นเป้าหมายทางชีววิทยาหรือเป็นยาที่มีศักยภาพ นอกจากนี้ยังมีการใช้งานที่สำคัญสำหรับระบบการแสดงออกในการหมักอุตสาหกรรมสะดุดตาผลิตชีวเวชภัณฑ์เช่นมนุษย์อินซูลินในการรักษาโรคเบาหวานและการผลิตเอนไซม์

ระบบการผลิตโปรตีนปกติระบบการผลิตที่ใช้โปรตีนรวมถึงผู้ที่ได้รับมาจากเชื้อแบคทีเรียยีสต์เชื้อไวรัส / แมลงเลี้ยงลูกด้วยนมเซลล์และเมื่อเร็ว ๆ นี้ใยเชื้อราเช่นMyceliophthora thermophilaเมื่อมีการผลิตสารชีวภัณฑ์ด้วยระบบใดระบบหนึ่งสิ่งสกปรกที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการที่เรียกว่าโปรตีนของเซลล์โฮสต์ก็มาถึงผลิตภัณฑ์ขั้นสุดท้ายในปริมาณที่ติดตามได้สนับสนุนโดยslotxo เว็บ สล็อตxo ระบบที่ใช้เซลล์ระบบการแสดงออกที่เก่าแก่ที่สุดและใช้กันอย่างแพร่หลายนั้นใช้เซลล์เป็นหลักและอาจถูกกำหนดให้เป็น "การรวมกันของเวกเตอร์นิพจน์ดีเอ็นเอที่โคลนของมันและโฮสต์สำหรับเวกเตอร์ที่ให้บริบทเพื่ออนุญาตให้ยีนแปลกปลอมทำงานในเซลล์โฮสต์ คือผลิตโปรตีนในระดับสูง " Overexpression เป็นระดับผิดปกติและสูงมากเกินไปของการแสดงออกของยีนซึ่งเป็นผู้ผลิตยีนที่เกี่ยวข้องกับเด่นชัดฟีโนไทป์

มีหลายวิธีในการนำDNAแปลกปลอมไปยังเซลล์เพื่อการแสดงออกและอาจใช้เซลล์โฮสต์ที่แตกต่างกันจำนวนมากในการแสดงออก - ระบบการแสดงออกแต่ละระบบมีข้อดีและข้อเสียที่แตกต่างกัน โดยปกติระบบการแสดงออกจะอ้างถึงโดยโฮสต์และแหล่งที่มาของดีเอ็นเอหรือกลไกการส่งมอบสารพันธุกรรม ยกตัวอย่างเช่นครอบครัวส่วนใหญ่จะเป็นเชื้อแบคทีเรีย (เช่นE.coli , B. subtilis ) ยีสต์ (เช่นS.cerevisiae ) หรือ eukaryotic เซลล์ แหล่งที่มาของดีเอ็นเอทั่วไปและกลไกการส่งมอบคือไวรัส (เช่นbaculovirus , retrovirus ,adenovirus ), พลาสมิด , โครโมโซมเทียมและแบคเทอริโอเฟจ (เช่นแลมบ์ดา ) ระบบการแสดงออกที่ดีที่สุดขึ้นอยู่กับยีนที่เกี่ยวข้องเช่นSaccharomyces cerevisiaeมักจะเป็นที่ต้องการสำหรับโปรตีนที่จำเป็นต้องใช้อย่างมีนัยสำคัญดัดแปลงหลัง เซลล์ของแมลงหรือสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมถูกนำมาใช้เมื่อจำเป็นต้องมีการประกบ mRNA เหมือนมนุษย์ อย่างไรก็ตามการแสดงออกของแบคทีเรียมีข้อได้เปรียบในการผลิตโปรตีนจำนวนมากได้ง่ายซึ่งจำเป็นสำหรับการตกผลึกด้วยรังสีเอกซ์หรือการสั่นพ้องของแม่เหล็กนิวเคลียร์ การทดลองเพื่อกำหนดโครงสร้าง

เนื่องจากแบคทีเรียเป็นโปรคาริโอตจึงไม่ได้ติดตั้งเครื่องจักรเอนไซม์เต็มรูปแบบเพื่อทำการดัดแปลงหลังการแปลหรือการพับโมเลกุลที่จำเป็น ดังนั้นโปรตีนยูคาริโอตหลายโดเมนที่แสดงออกในแบคทีเรียจึงมักไม่สามารถใช้งานได้ นอกจากนี้โปรตีนจำนวนมากยังไม่ละลายน้ำในฐานะที่เป็นเนื้อรวมที่ยากต่อการฟื้นตัวโดยไม่ต้องมีสารเดนาตูแรนท์ที่รุนแรงและการรีโฟลด์โปรตีนที่ยุ่งยากในภายหลัง

 

เพื่อแก้ไขข้อกังวลเหล่านี้ระบบการแสดงออกโดยใช้เซลล์ยูคาริโอตหลายเซลล์ได้รับการพัฒนาสำหรับการใช้งานที่ต้องการให้โปรตีนมีรูปแบบเหมือนหรือใกล้เคียงกับสิ่งมีชีวิตยูคาริโอตมากขึ้น: เซลล์ของพืช (เช่นยาสูบ) ของแมลงหรือสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม (เช่นวัว) ได้รับการถ่ายยีนและ เพาะเลี้ยงในรูปแบบแขวนลอยและแม้กระทั่งเป็นเนื้อเยื่อหรือสิ่งมีชีวิตทั้งหมดเพื่อผลิตโปรตีนที่พับได้เต็มที่ ระบบการแสดงออกของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมในสัตว์เลี้ยงมีผลผลิตต่ำและมีข้อ จำกัด อื่น ๆ (ใช้เวลานานความเป็นพิษต่อเซลล์เจ้าบ้าน ... ) เพื่อรวมผลผลิต / ผลผลิตที่สูงและคุณลักษณะของโปรตีนที่ปรับขนาดได้ของแบคทีเรียและยีสต์และลักษณะทาง epigenetic ขั้นสูงของพืชแมลงและระบบสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมระบบการผลิตโปรตีนอื่น ๆ ได้รับการพัฒนาโดยใช้ยูคาริโอตที่มีเซลล์เดียว (เช่นLeishmania "ที่ไม่ก่อให้เกิดโรค" เซลล์)



ผู้ตั้งกระทู้ หมวย (bamkannika003132-at-gmail-dot-com) :: วันที่ลงประกาศ 2020-10-27 12:32:31


แสดงความคิดเห็น
ความคิดเห็น *
ผู้แสดงความคิดเห็น  *
อีเมล 
ไม่ต้องการให้แสดงอีเมล



Copyright © 2013 All Rights Reserved.