การโคลนโมเลกุลหมายถึงกระบวนการทำให้โมเลกุลหลาย ๆ การโคลนมักใช้เพื่อขยายชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่มียีนทั้งหมดแต่ยังสามารถใช้เพื่อขยายลำดับดีเอ็นเอใด ๆ เช่นโปรโมเตอร์ลำดับที่ไม่เข้ารหัสและดีเอ็นเอที่แยกส่วนแบบสุ่ม ถูกนำไปใช้ในการทดลองทางชีววิทยาและการใช้งานจริงมากมายตั้งแต่การพิมพ์ลายนิ้วมือทางพันธุกรรมไปจนถึงการผลิตโปรตีนขนาดใหญ่ ในบางครั้งคำว่าโคลนนิ่งถูกนำมาใช้อย่างผิด ๆ เพื่ออ้างถึงการระบุตำแหน่งโครโมโซมของยีนที่เกี่ยวข้องกับฟีโนไทป์เฉพาะที่สนใจเช่นในการโคลนตำแหน่ง. ในทางปฏิบัติการแปลยีนเป็นโครโมโซมหรือภูมิภาคจีโนมไม่จำเป็นต้องทำให้ยีนแยกหรือขยายลำดับจีโนมที่เกี่ยวข้องได้ ในการขยายลำดับดีเอ็นเอใด ๆ ในสิ่งมีชีวิตลำดับนั้นจะต้องเชื่อมโยงกับจุดกำเนิดของการจำลองแบบซึ่งเป็นลำดับของดีเอ็นเอที่สามารถกำกับการแพร่กระจายของตัวมันเองและลำดับที่เชื่อมโยงกันได้ แต่จำนวนของคุณสมบัติอื่น ๆ ที่มีความจำเป็นและความหลากหลายของความเชี่ยวชาญเวกเตอร์โคลน (ชิ้นเล็ก ๆ ของดีเอ็นเอเป็นที่ส่วนดีเอ็นเอต่างประเทศสามารถแทรก) มีอยู่ที่ช่วยให้การผลิตโปรตีน , การติดแท็กความสัมพันธ์เดี่ยว stranded RNAหรือดีเอ็นเอการผลิตและการเป็นเจ้าภาพ ของเครื่องมืออณูชีววิทยาอื่น ๆสนับสนุนโดย slotxo เว็บ สล็อตxo การโคลนชิ้นส่วนดีเอ็นเอใด ๆ โดยพื้นฐานแล้วเกี่ยวข้องกับสี่ขั้นตอนการแยกส่วน - แยกส่วนของดีเอ็นเอligation - ติดกาวดีเอ็นเอเข้าด้วยกันตามลำดับที่ต้องการการถ่ายโอน - การใส่ชิ้นส่วนดีเอ็นเอที่สร้างขึ้นใหม่ลงในเซลล์การคัดกรอง / การคัดเลือก - การเลือกเซลล์ที่ประสบความสำเร็จในการถ่ายโอนด้วยดีเอ็นเอใหม่แม้ว่าขั้นตอนเหล่านี้จะไม่สามารถเปลี่ยนแปลงได้ระหว่างขั้นตอนการโคลนนิ่ง แต่สามารถเลือกเส้นทางอื่นได้หลายเส้นทาง เหล่านี้จะสรุปได้ว่าเป็นกลยุทธ์การโคลน

ในขั้นต้นจำเป็นต้องแยกดีเอ็นเอที่สนใจเพื่อให้ได้ส่วนของดีเอ็นเอที่มีขนาดเหมาะสม ต่อจากนั้นจะใช้ขั้นตอน ligation โดยที่ส่วนขยายจะถูกแทรกลงในเวกเตอร์ (ชิ้นส่วนของ DNA) เวกเตอร์ (ซึ่งเป็นวงกลมบ่อย) เป็นเชิงเส้นโดยใช้เอนไซม์ข้อ จำกัดและบ่มกับชิ้นส่วนของดอกเบี้ยตามเงื่อนไขที่เหมาะสมกับการทำงานของเอนไซม์ที่เรียกว่าดีเอ็นเอลิกาเซ หลังจาก ligation เวกเตอร์ที่มีส่วนแทรกที่น่าสนใจจะถูกถ่ายโอนไปยังเซลล์ มีเทคนิคอื่น ๆ อีกมากมายเช่นการทำให้เซลล์ไวต่อการไวต่อสารเคมีการอิเล็กโตรโฟเรชั่นการฉีดด้วยแสงและไบโอลิสติก. ในที่สุดเซลล์ที่เปลี่ยนถ่ายจะได้รับการเพาะเลี้ยง เนื่องจากขั้นตอนดังกล่าวมีประสิทธิภาพต่ำเป็นพิเศษจึงจำเป็นต้องระบุเซลล์ที่ถ่ายโอนสำเร็จแล้วด้วยโครงสร้างเวกเตอร์ที่มีลำดับการแทรกที่ต้องการในแนวที่ต้องการ เวกเตอร์การโคลนนิ่งสมัยใหม่รวมถึงเครื่องหมายการดื้อยาปฏิชีวนะที่เลือกได้ซึ่งอนุญาตให้เจริญเติบโตได้เฉพาะเซลล์ที่เวกเตอร์ได้รับการถ่ายโอนเท่านั้น นอกจากนี้เวกเตอร์การโคลนนิ่งอาจมีเครื่องหมายการเลือกสีซึ่งให้การคัดกรองสีน้ำเงิน / ขาว (การเติมเต็มปัจจัยอัลฟา) บนX-galปานกลาง อย่างไรก็ตามขั้นตอนการคัดเลือกเหล่านี้ไม่ได้รับประกันอย่างแน่นอนว่ามีดีเอ็นเอแทรกอยู่ในเซลล์ที่ได้รับ จำเป็นต้องมีการตรวจสอบเพิ่มเติมเกี่ยวกับอาณานิคมที่เกิดขึ้นเพื่อยืนยันว่าการโคลนนิ่งประสบความสำเร็จ ซึ่งอาจทำได้โดยวิธีPCRวิเคราะห์ข้อ จำกัด ชิ้นส่วนและ / หรือลำดับดีเอ็นเอ

 การโคลนโคโลนีของเซลล์ไลน์โดยใช้วงแหวนโคลน การโคลนเซลล์หมายถึงการได้มาซึ่งประชากรของเซลล์จากเซลล์เดียว ในกรณีของสิ่งมีชีวิตที่มีเซลล์เดียวเช่นแบคทีเรียและยีสต์กระบวนการนี้ทำได้ง่ายอย่างน่าทึ่งและโดยพื้นฐานแล้วต้องอาศัยการฉีดเชื้อจากตัวกลางที่เหมาะสมเท่านั้น อย่างไรก็ตามในกรณีของการเพาะเลี้ยงเซลล์จากสิ่งมีชีวิตหลายเซลล์การโคลนนิ่งเซลล์ถือเป็นงานที่ยากลำบากเนื่องจากเซลล์เหล่านี้จะไม่เติบโตได้อย่างง่ายดายในสื่อมาตรฐาน